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云南中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院在國際藥學(xué)研究發(fā)志發(fā)表的文獻(xiàn)

使用本公司構(gòu)建的質(zhì)粒的文獻(xiàn)

摘要   目的 在大腸桿菌中異源表達(dá)和純化人源Parkin蛋白。方法 構(gòu)建帶有人源Parkin基因的克隆載體，測序保證
Parkin基因序列正確后，構(gòu)建異源表達(dá)載體pET-28a/Parkin；在Escherichia coli BL21（DE3）中誘導(dǎo)人源Parkin蛋白過表達(dá)，采用
鎳親和色譜純化人源Parkin蛋白，用Western印跡（WB）和熒光分光光度法評價人源Parkin蛋白活性。結(jié)果 人源Parkin蛋白
在E. coli BL21（DE3）中獲高表達(dá)，經(jīng)鎳親和色譜純化后除去了大量雜蛋白，得到富集；WB和熒光分光光度法檢測均證實異源
表達(dá)的人源 Parkin 蛋白具有生物活性。結(jié)論 通過異源表達(dá)技術(shù)獲得高純度的且具有生物活性的人源 Parkin 蛋白，可用于
Parkin調(diào)節(jié)劑的快速篩選與研究。


［關(guān)鍵詞］ Parkin；泛素化；異源表達(dá)；蛋白純化；檢測活性

［中圖分類號］ Q71 ［文獻(xiàn)標(biāo)志碼］ A ［文章編號］ 1674-0440（2020）12-1146-06

  DOI：10.13220/j.cnki.jipr.2020.12.017

 http://www.doc88.com/p-00099892449898.html






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